Säurebeständigkeit - Acid-fastness
Säurebeständigkeit ist eine physikalische Eigenschaft bestimmter Bakterien- und eukaryontischer Zellen sowie einiger subzellulärer Strukturen, insbesondere deren Beständigkeit gegen Entfärbung durch Säuren während Laborfärbungsverfahren . Einmal als Teil einer Probe gefärbt, können diese Organismen den in vielen Färbeprotokollen üblichen Entfärbungsverfahren auf Säure- und/oder Ethanolbasis widerstehen, daher der Name säurefest .
Die Mechanismen der Säurebeständigkeit variieren je nach Art, obwohl das bekannteste Beispiel in der Gattung Mycobacterium zu finden ist , die die für Tuberkulose und Lepra verantwortlichen Arten umfasst. Die Säurebeständigkeit von Mykobakterien ist auf den hohen Mykolsäuregehalt ihrer Zellwände zurückzuführen , der für das Färbemuster einer schlechten Absorption gefolgt von einer hohen Retention verantwortlich ist. Einige Bakterien können auch teilweise säurefest sein, wie z. B. Nocardia .
Säurefeste Organismen sind mit mikrobiologischen Standardtechniken schwer zu charakterisieren, obwohl sie mit konzentrierten Farbstoffen gefärbt werden können, insbesondere wenn der Färbeprozess mit Hitze kombiniert wird. Einige, wie Mykobakterien , können mit der Gram-Färbung gefärbt werden , aber sie nehmen das Kristallviolett nicht gut auf und erscheinen daher hellviolett, was möglicherweise immer noch zu einer falschen Gram-negativen Identifizierung führen kann.
Die gebräuchlichste Färbetechnik zur Identifizierung säurefester Bakterien ist die Ziehl-Neelsen-Färbung , bei der die säurefesten Spezies hellrot angefärbt werden und sich deutlich von einem blauen Hintergrund abheben. Eine andere Methode ist die Kinyoun-Methode , bei der die Bakterien leuchtend rot angefärbt werden und sich deutlich von einem grünen Hintergrund abheben. Säurefeste Mykobakterien können auch durch Fluoreszenzmikroskopie unter Verwendung spezifischer Fluoreszenzfarbstoffe ( z. B. Auramin-Rhodamin-Färbung ) sichtbar gemacht werden . Die Eier des parasitären Lungenegels Paragonimus westermani werden durch die Färbung tatsächlich zerstört, was die Diagnose bei Patienten mit TB-ähnlichen Symptomen erschweren kann.
Einige säurefeste Färbetechniken
- Ziehl-Neelsen-Färbung (klassische und modifizierte Bleichtypen)
- Kinyoun-Fleck
- Für farbenblinde Menschen (oder in Hintergründen, in denen der Nachweis von roten Bakterien schwierig ist) kann Victoria-Blau durch Karbolfuchsin ersetzt werden und Pikrinsäure kann als Gegenfärbung anstelle von Methylenblau verwendet werden , und der Rest der Kinyoun-Technik kann verwendet werden.
- Verschiedene Techniken zur Färbung von Bakteriensporen mit Kenyon zB
- Moellers Methode
- Dorner-Methode (Säure-Alkohol-Entfärber) ohne die Schaeffer-Fulton- Modifikation (Entfärbung durch Wasser)
- Waschmittelmethode mit Tergitol 7, nichtionische Polyglykolether- Tenside Typ NP-7
- Verschiedene Techniken zur Färbung von Bakteriensporen mit Kenyon zB
- Fite Fleck
- Ellis- und Zabrowarny-Färbung (kein Phenol/Karbolsäure)
- Auramin-Rhodamin-Färbung
- Auramin-Phenol-Fleck
Bemerkenswerte säurefeste Strukturen
Sehr wenige Strukturen sind säurefest; dies macht das Anfärben auf Säurebeständigkeit für die Diagnose besonders nützlich. Im Folgenden sind bemerkenswerte Beispiele für Strukturen, die säurefest oder modifiziert säurefest sind:
- Alle Mykobakterien - M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis und atypisches Mycobacterium
-
Actinomyceten (insbesondere einige aerobe) mit Mykolsäure in ihrer Zellwand (beachten Sie, dass Streptomyces KEINE haben); nicht zu verwechseln mit Actinomyces , einer nicht säurefesten Gattung von Actinomyceten
- Nocardia (schwach säurebeständig; widersteht Entfärbung bei schwächeren Säurekonzentrationen)
- Rhodococcus
- Gordonia (ein Aktinomycet)
- Tsukamurella
- Dietzia
- Kopf des Spermas
- Bakteriensporen, siehe Endospor
- Legionella micdadei
- Bestimmte zelluläre Einschlüsse, z
- Zytoplasmatische Einschlusskörperchen in
- Neuronen in Schicht 5 der neuronalen Ceroid-Lipofuszinose der Großhirnrinde ( Batten-Krankheit ).
- Nukleare Einschlusskörper in
- Bleivergiftung
- Wismutvergiftung.
- Zytoplasmatische Einschlusskörperchen in
- Oozysten einiger Kokzidienparasiten in Fäkalien, wie:
- Ein paar andere Parasiten:
- Sarkozystis
- Taenia saginata- Eier färben sich gut, Taenia solium- Eier jedoch nicht (kann zur Unterscheidung verwendet werden)
- Hydatidenzysten , insbesondere ihre " Häkchen " färben sich unregelmäßig mit ZN-Färbung, strahlen jedoch unter grünem Licht eine leuchtend rote Fluoreszenz aus und können die Erkennung in mäßig starken Hintergründen oder mit wenigen Häkchen unterstützen.
- Pilzhefeformen werden inkonsistent mit säurefester Färbung gefärbt, die als Schmalspektrum-Färbung für Pilze gilt. In einer Studie zur Säurebeständigkeit von Pilzen zeigten 60 % der Blastomyces und 47 % der Histoplasmen eine positive zytoplasmatische Färbung der hefeähnlichen Zellen, und Cryptococcus oder Candida zeigten keine Färbung, und sehr selten wurde eine Färbung bei Coccidioides-Endosporen beobachtet.
Verweise
Beispiele für Online-Protokolle
- Ziehl-Neelsen- Protokoll ( PDF- Format).
- Alternative Methode von Ellis & Zabrowarny Archiviert am 04.01.2006 an der Wayback-Maschine zum Färben von AFB.