Kinyoun-Fleck - Kinyoun stain

Die Kinyoun-Methode oder Kinyoun-Färbung (Kältemethode), entwickelt von Joseph J. Kinyoun , ist ein Verfahren, das verwendet wird, um säurefeste Spezies der Bakteriengattungen Mycobacterium und Nocardia und der Apicomplexan- Gattung Cryptosporidium zu färben . Es ist eine Variante einer Methode, die 1882 von Robert Koch entwickelt wurde. Bestimmte Bakterienarten haben in ihren Zellwänden ein wachsartiges Lipid namens Mykolsäure, das es ihnen ermöglicht, mit Acid-Fast besser als mit Gram-Stain gefärbt zu werden. Die einzigartige Fähigkeit von Mykobakterien, der Entfärbung durch Säurealkohol zu widerstehen, ist der Grund, warum sie als säurefest bezeichnet werden. Dabei werden eine Primärfärbung ( basisches Fuchsin ), ein Entfärber (Säure-Alkohol) und eine Gegenfärbung ( Methylenblau ) aufgetragen . Im Gegensatz zur Ziehl-Neelsen-Färbung (ZN-Färbung) erfordert die Kinyoun-Färbung keine Erwärmung. Bei der Ziehl-Neelsen-Färbung wirkt Hitze als physikalisches Beizmittel, während Phenol (Carbol von Carbol Fuschin) als chemisches Beizmittel fungiert. Da es sich bei der Kinyoun-Färbung um eine kalte Methode handelt (keine Wärmeanwendung), wird die Konzentration des verwendeten Karbolfuschins erhöht.

Zusammenfassung der säurefesten Beize (Kinyoun-Färbung)
Anwendung von Reagens Zellenfarbe
Säure schnell säurefrei schnell
Primärfarbstoff Karbol Fuchsin rot rot
Entfärber Säurealkohol rot Farblos
Gegen Fleck Methylenblau rot Blau

Färbeverfahren

Kinyoun-Färbung auf dem Organismus Mycobacterium smegmatis

Machen Sie einen säurefesten Fleck

Materialien

  • Objektträger mit Organismenabstrich
  • Carbol Fuchsin
  • Säure-Alkohol
  • Methylenblau
  • biblisches Papier
  • Mikroskop

Anweisungen

  1. Abstrich auf einem Objektträger mit Organismen
    • Objektträger reinigen, Objektträger mit Wachsetiketten beschriften, Organismus verteilen, 10 Minuten an der Luft trocknen, hitzefixieren
  2. Tauchen Sie den Objektträger 20 Minuten lang in Carbol Fuchsin.
  3. Spülschieber
  4. Objektträger 3-5 Sekunden in Säure-Alkohol tauchen.
  5. Spülschieber
  6. Objektträger 30 Sekunden lang in Methylenblau tauchen.
  7. Spülschieber
  8. Objektträger mit saugfähigem Papier trocken tupfen.
  9. Unter dem Mikroskop beobachten.

Änderung

Die Kinyoun-Methode kann als schwach säurebeständige Beize modifiziert werden, die anstelle von Salzsäure 5% Schwefelsäure verwendet. Die schwach säurefeste Färbung färbt zusätzlich zur Färbung von Mykobakterien Organismen, die das Karbolfuchsin nach dem Entfärben mit HCl nicht erhalten können.

Siehe auch

Verweise

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